Advanced 原代細胞轉染試劑
一、應用:
- 各種細胞類型中最高的轉染效率。
-Advanced DNA RNA Transfection Reagent™可用于多種真核細胞系的DNA轉染、siRNA轉染和共轉染。
-Advanced DNA RNA Transfection Reagent™可用于各種原代細胞的DNA轉染、siRNA轉染。
二、原代細胞轉染試劑產品描述:
Advanced 轉染試劑 Advanced DNA RNA Transfection Reagent™ 是一種新開發(fā)的試劑,用于將 DNA 和 siRNA 轉染到真核細胞系和各種原代細胞中。
儲存條件:4°C(不可冷凍)
有效期:2年
三、原代細胞轉染試劑轉染要求
質粒DNA:200ng/ul-2ug/ul;
溶于ddH 2 O或超純水;
去除內毒素;
siRNA:20 uM/L
四、原代細胞轉染試劑轉染程序
1. 提前1天在細胞培養(yǎng)板上種植細胞,轉染時細胞融合度應為60-80%,并保持細胞狀態(tài)。轉染應在良好狀態(tài)下進行。
2、復合制備:將核酸與轉染試劑按1:1的比例直接混合,然后用移液器吹10-15次混合。室溫孵育10-15分鐘后,制備轉染復合物。在復合物的制備過程中,確保管壁上沒有液體殘留物。
3. 在細胞培養(yǎng)板中加入轉染復合物,輕輕混勻,放入CO 2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
原代細胞轉染試劑轉染梯度
細胞培養(yǎng)板 | 96孔 | 48孔 | 24孔 | 12孔 | 6孔 | 35 毫米 | 60 毫米 | 100 毫米 | 25 | 75 |
轉染試驗d osag È (UL) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
脫氧核糖核酸 d奧沙(UG) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
siRNA d奧沙(UL) | 0.4/0.5 0.6/0.8 | 0.8/1 1.3/1.5 | 1.5/2 2.5/3 | 3/4 5/6 | 6/8 10/12 | 7.5/10 12.5/15 | 15/20 25/30 | 45/60 75/90 | 19/25 31/38 | 56/75 94/113 |
培養(yǎng)基 劑量 | 125ul | 250ul | 500ul | 1毫升 | 2毫升 | 2.5毫升 | 5毫升 | 15毫升 | 6毫升 | 19毫升 |