細(xì)胞培養(yǎng)系列第四期，繼續(xù)為大家分享細(xì)胞培養(yǎng)中遇到的問題集錦。

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問：買的無血清凍存液說明書上寫的直接放入-80度

答：那是直接凍存的，大多數(shù)凍存液都是梯度凍存

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問：初學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)，養(yǎng)的是hepG2，每次到3天的時(shí)候培養(yǎng)基就會(huì)發(fā)黃，鏡下看到像是死細(xì)胞聚集成團(tuán)的大片東西，請(qǐng)問這種情況是染菌了嗎？請(qǐng)問如何處理?那種像死細(xì)胞聚集成團(tuán)的感覺是綠色，請(qǐng)問這是染菌嗎？（不是每次這樣，之前都很好，現(xiàn)在三瓶里有一瓶出現(xiàn)這種情況）

答：綠色的感覺像真菌，也有可能是細(xì)胞密度高了，細(xì)胞代謝物多。

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問：有用清除劑處理過一禮拜，看著挺干凈，但是一禮拜培養(yǎng)三代又出來了，這種是沒清除干凈還是，可能環(huán)境有污染重復(fù)的染到了？

答：這個(gè)污染比較頑固，至少要?dú)?周，甚至一個(gè)月

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問：真菌污染一般原因是什么啊

答：真菌里的根霉一般是環(huán)境

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問：貝克曼細(xì)胞計(jì)數(shù)儀中DT值是啥意思？轉(zhuǎn)染后DT值會(huì)增加嗎？為什么會(huì)增加呢？

答：是群體倍增時(shí)間，就是細(xì)胞數(shù)增長一倍需要的時(shí)間，一個(gè)常用的評(píng)價(jià)細(xì)胞生長的指標(biāo)。我們接觸的一般是增加的。大量表達(dá)外源蛋白，會(huì)占用細(xì)胞生長的資源，這個(gè)可能是主要因素。外源基因插入基因組可能也有影響。

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